Capitolo 7, Manuale sulla biosicurezza: Decontaminazione

La decontaminazione di colture e oggetti contaminati da agenti biologici viene eseguita di routine nei laboratori microbiologici. La decontaminazione è una componente vitale della pratica di sicurezza microbiologica e serve a proteggere il personale di laboratorio (così come altri) dalle infezioni, nonché dal rilascio di organismi infettivi nell'ambiente esterno. È necessaria anche la decontaminazione dei terreni, delle superfici di lavoro e delle attrezzature per prevenire la contaminazione degli organismi coltivati.

La decontaminazione delle superfici di lavoro, delle attrezzature, delle cabine di sicurezza biologica e di altri oggetti inanimati utilizzando agenti antimicrobici viene definita disinfezione. Diversi agenti chimici vengono utilizzati come disinfettanti. Gli operatori di laboratorio dovrebbero ricordare che esistono rischi associati a tutti questi disinfettanti chimici. L'inalazione e il contatto con la pelle devono essere ridotti al minimo ed evitare il contatto con gli occhi. Guanti e occhiali di sicurezza adeguati devono essere sempre indossati quando si maneggiano queste sostanze chimiche.

La suscettibilità dei microbi ai disinfettanti chimici varia in base alla loro struttura fisica e al loro stato fisico (ad esempio, stato delle spore più resistente). Ad esempio, la parete cellulare esterna cerosa dei micobatteri fornisce una maggiore resistenza. I virus privi di lipidi nel capside esterno li rendono più idrofili e generalmente più resistenti ai disinfettanti chimici rispetto ai virus lipofili. L'ordine di resistenza dei microbi ai disinfettanti chimici, dal più resistente al meno resistente, è presentato nella pagina successiva.

Di seguito è riportato un elenco delle resistenze dei microbi ai disinfettanti chimici, ordinate dal più resistente al meno resistente:

* Adattato da Biological Safety: Principles and Practices, Fleming, DO and Hunt, DL, a cura di, 4a edizione (2006), ASM Press, Washington, DC

Le informazioni pertinenti per alcuni dei comuni disinfettanti chimici sono riepilogate sotto forma di tabella alla fine di questo capitolo.

L'autoclave utilizza vapore saturo sotto pressione (circa 15 psi) per raggiungere una temperatura nell'autoclave di almeno 121 °C (250 °F). L'autoclavaggio può essere utilizzato per distruggere batteri vegetativi, spore batteriche e virus. Quando si decontaminano i rifiuti a rischio biologico, si raccomanda che la temperatura dei rifiuti raggiunga un minimo di 115 °C per un minimo di 20 minuti. Il tempo di elaborazione totale necessario per soddisfare queste condizioni dipende da diversi fattori di carico (vedi sotto); tuttavia, è necessario utilizzare un ciclo di autoclave minimo di un'ora durante la decontaminazione dei rifiuti a rischio biologico.

Ci sono tre fattori che insieme determinano l’efficacia della sterilizzazione in autoclave:

Temperatura: l'autoclave utilizza vapore a una pressione di circa 15 psi per raggiungere una temperatura della camera di almeno 121 °C. Anche se la camera dell'autoclave può raggiungere i 121 °C, ciò non significa necessariamente che l'interno del carico raggiunga questa temperatura.

Tempo: per la sterilizzazione di articoli puliti è comunemente consigliato un tempo minimo del ciclo dell'autoclave di venti minuti a una temperatura della camera di 121 °C (il tempo non inizia non appena viene avviato il ciclo dell'autoclave). Tuttavia, il tempo totale di trattamento necessario per ottenere la decontaminazione dipende da diversi fattori di carico, tra cui il contenitore di carico (proprietà di trasferimento di calore), la quantità di acqua contenuta nel carico e il peso del carico. Per carichi maggiori è necessario un tempo di ciclo più lungo per garantire una decontaminazione efficace. Per il trattamento dei rifiuti a rischio biologico è richiesto un tempo minimo di autoclave di 60 minuti. Le esenzioni al tempo minimo di autoclave di 60 minuti saranno prese in considerazione caso per caso e dovranno essere approvate dal responsabile della biosicurezza o dal comitato istituzionale per la biosicurezza. Le richieste di esenzione devono essere presentate al responsabile della biosicurezza con una POS scritta che descriva i rifiuti a rischio biologico, le condizioni dell'autoclave, il tempo dell'autoclave, la procedura di test di efficacia dell'autoclave e la frequenza dei test. In nessun caso sarà approvato un tempo di autoclave inferiore a 30 minuti.

Contatto: la saturazione del vapore è essenziale per il massimo trasferimento di calore. Il vapore deve entrare in contatto con tutte le aree del carico. I sacchetti dell'autoclave e gli altri contenitori devono essere lasciati parzialmente aperti (o altrimenti consentire l'ingresso del vapore) per garantire un contatto adeguato. Gli studi hanno dimostrato che l'aggiunta di acqua all'interno della sacca migliora il profilo tempo-temperatura del ciclo dell'autoclave, aumentando l'efficienza di sterilizzazione dell'autoclave.